抗日战争初期，深受日寇之害的敌占区民族资本家王尧翁为自保，以提供军饷和军械装备为条件，提出与国民党某军长、他的结拜兄弟于子才合作训练一支对抗日寇的女子别动队。于子才答应，派出自己的贴身警卫官杨干乔（刘威）负责执行以“蓝色铁锚行动”为名的特殊训练任务，八名流亡女青年被带到深山中的偏僻军营，开始了严格、残酷的训练。 王尧翁运给于子才的军饷和军械被勾结日伪汉奸的田八爷所截，女子别动队第一次出动，虽有队员牺牲，但出色完成任务，王尧翁非常满意，挑出菲菲（张悦楷）作他的贴身保镖，其他队员在杨干乔带领下深入敌占区继续行动，漂亮的林曼云（何晴）化身当红舞女出现在汉奸头目宋宝先身边。风云变幻，王尧翁与于子才为了私利也做汉奸，而杨干乔对于子才向来死忠。

该剧讲述了1939年抗日战争进入相持阶段，龙虎山抗日游击支队女子别动队与日本人进行浴血奋战，先后完成了夺取藏宝图、截获731细菌样品、保护国家文物、运出盘尼西林、夺取特高科密码本、营救重要人物等异常艰难的任务，最终粉碎了敌人细菌战的故事。

1942年5月，华北日军发动“五一大扫荡”，对我冀中军区根据地进行“铁壁合围”。八路军某部侦察队长刘汉带队，由山中猎户出身的李家兄弟等人作为向导，在护送机要员魏先生前往冀中军区的途中遭遇日军扫荡部队，被迫分头潜入安定县城，却在县城联络点被特务队伏击。负伤的刘汉被洪大宝所救，在妇救会长王玉兰帮助下得到上级的命令，伤愈后留在安定地区建立敌后武工队，打击日寇。刘汉在进步青年钟婷婷，猎户出身的李元杰，抗日救国军的郑二宝等人的帮助下，与安定县城的日军展开了斗智斗勇的战斗，他们灵活机智，运用各种手段打击日寇，队伍也在对日战斗中得到成长，成为一把插在敌人胸口的刺刀，沉重地打击了日本侵略者的嚣张气焰，为即将到来的主力部队大反攻，收复安定县城奠定了基础，为取得抗日战争的最终胜利，做出了自己的一份贡献。

该剧以牺牲在雁北抗日战场上的民族女英雄李林为原型，塑造了一个以李林为中心的抗日、爱国、革命、青春的群体。再现了李林、崔小楠、杜大海、刘子豪、肖海云等一系列英雄人物，以他们感人肺腑的友谊、荡气回肠的爱情，褒扬了高尚的人生信念、信仰与理想，赞美了伟大崇高的爱国主义情操，真实地再现了惊心动魄的战争场景、浴血厮杀的悲壮画面。